Фенотипы и генетика

Фенотипы и генетика

Прививочная мишень: 5×1 мм Место нанесения проб: 2 см от катодного края пластины. Режим изоэлектрофокусирования (максимальные параметры): Р=10 Вт; 1=10 мА; U= = 1600 В. Температура охлаждения: 10 °С Предварительное фокусирование: 2 ч. Фокусирование с пробами: 2 мин Фюкусирование без проб: 2,5 ч. Фиксация: иммунная фиксация сывороткой анти-Gc по возможности высокого титра в течение нескольких минут (при необходимости сыворотку анти-Gc разводят); промывают в проточной воде в течение ночи. Фиксация: иммунная фиксация сывороткой анти-Gc по возможности высокого титра в течение нескольких минут (при необходимости сыворотку анти-Gc разводят); промывают в проточной воде в течение ночи. Окрашивание: кумасси синий (Coomassie Blue) — универсальный рецепт применения, 30 мин при 60 °С. Обесцвечивание: при необходимости (визуальный контроль) в течение нескольких часов.

Характерным для описанной методики является прямая иммунная фиксация протеинов Gc, т.е. нанесение антисыворотки на поверхность полиакриламидного геля. Для более детального изучения гликопротеиповых структур, как основных типов Gc, так и «вариантных» типов, испытуемые образцы сывороток обрабатывают нейраминидазой Cleve, Patutschnick, 1979. Посредством изоэлектрофокусирования в полиакриламидном геле, содержащем мочевину в 3 М концентрации, удалось выявить целый ряд дополнительных генетически детерминированных вариантов системы Gc Constans el al. , 1983.

Этот метод обладает исключительной разделительной способностью, во много раз превышающей разделительную способность при использовании обычного изоэлектрофокусироваиия с иммобилизованными градиентами pH Cleve et al. В 1959 г. J. Hirschfeld с помощью иммуноэлектрофореза в геле агара при использовании обычных гетероиммунных сывороток, преципитирующих белки человека, обнаружил в области аг-глобулинов полиморфизм одного белка, названного им группоспецифическим компонентом (Group-specific component, Gc), причем полиморфизм этого белка не был связан с выявленным ранее групповым полиморфизмом сывороточного гаптоглобина (Нр).

1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд (Еще не оценили)
Loading...

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Можно использовать следующие HTML-теги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>

Подтвердите, что Вы не бот — выберите человечка с поднятой рукой: